基因测序相关

1、双脱氧链末端终止法

基本原理:
双脱氧链末端终止法通过使用链终止剂—类似于正常dNTP的2’,3’-双脱氧核苷三磷酸(ddNTP),将延伸的DNA链特异性地终止。

其反应体系也包括单链模板、引物、4种dNTP和DNA聚合酶。

共分四组,每组按一定比例加入一种(ddNTP),它能随机渗入合成的DNA链,一旦渗入合成即终止,于是各种不同大小片段的末端核苷酸必定为该种核苷酸,可以从放射自显影带上直接阅读DNA的核苷酸序列。

Sanger DNA测序仪的发展历程

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